在液相色譜上遇到的問題有很多，例如HPLC 色譜柱的一些常見問題時有出現，可能會(hui) 令很多實驗員感到非常沮喪(sang) 。那麽(me) 今天，景源帶您了解這些是什麽(me) 以及如何解決(jue) 它們(men) 可以讓您避免數小時的挫敗感。

一、無峰值：

       可能有多種因素會(hui) 導致 HPLC 輸出中不出現峰或出現非常小的峰。正常讀數應該又大又細的峰值，高度也是會(hui) 有不一樣的。小峰或沒峰可能代表檢測器燈已關(guan) 閉，沒有流動相流量和樣品丟(diu) 失或變質，或者檢測器、積分器、進樣器閥或記錄器這些有問題存在。

     其實先要確保探測器是打開狀態，然後檢查所有連接情況。確保自動進樣器樣品瓶中有足夠的液體(ti) 和樣品中無氣泡情況出現，並使用新的標液重新進行係統的檢查。

二、無流量：

       如果沒有出峰，很有可能是HPLC 色譜柱中沒有流量；也可能意味著泵已關(guan) 閉或流量因某種原因中斷或受阻；同時泵頭中也可能存在泄漏或空氣滯留。

       如果泵關(guan) 閉，需要啟動泵並檢查儲(chu) 液器中的流動相液位和整個(ge) 係統的流量情況。檢查樣品環是否有其他障礙物或氣塞，並確保流動相組分可混溶且流動相是否能夠進行正常脫氣。繼續檢查係統鬆動情況，檢查泵是否有泄漏等其他問題。

三、壓力問題：

      要是壓力低於(yu) 平常或無壓力這有可能是係統某處發生泄漏或空氣滯留；要是係統壓力過高，那麽(me) 泵、進樣器、在線過濾器、保護柱、分析柱或管路都可能有問題。

      如果是檢查發現是低壓，那就要檢查整個(ge) 色譜係統是否存在泄漏、泵密封件故障或閥門損壞的情況等。如果是高壓的話，先從(cong) 移除保護柱和分析柱，並用接頭替換，將進樣器重新連接到檢測器。以 2-5 mL/min 的速度運行泵，並開始查找原因，。如果問題是出現在分析柱上，請在分析柱與(yu) 檢測器斷開連接時反轉，並衝(chong) 洗色譜分析柱；在必要的時候更換入口濾芯或更換柱子。

四、裂峰：

       如果發現峰出現在中間下降形成M形，那麽(me) 可能是分析柱入口可能存在一些汙染；也可能在色譜柱入口處有篩板被堵塞了或存在了不均勻的空隙；還有可能是樣品溶劑與(yu) 流動相不相容。

       如果是入口處有汙染，請反轉並衝(chong) 洗色譜柱，並在需要時更換篩板。還可以用具有相同鍵合相功能的薄膜顆粒重新填充色譜柱頂部，並繼續以反向流動方向使用色譜柱；如果是問題出在樣品上，請調整流動相中的樣品，因為(wei) 樣品和流動相中的 pH 值差異會(hui) 導致分峰。

五、尾峰和前峰：

       發現峰不是直線上升和下降，而是開始在前麵或後麵就形成輕微的傾(qing) 斜，則稱為(wei) 前端或尾部。這通常可能是保護柱或分析柱受損或是色譜柱過載。如果有拖尾峰，請先移除保護柱並嚐試分析，必要時就需要更換。如果需要恢複或更換分析柱。一定要檢查流動相的組成和色譜柱的性能。有前峰的話，請嚐試注入更小的體(ti) 積或稀釋樣品；如果溶劑有問題請調整溶劑，並使用 50 柱體(ti) 積的 HPLC 級乙酸乙酯以標準流速的兩(liang) 倍或三倍衝(chong) 洗極性鍵合相柱，然後在開始分析之前使用中等極性溶劑。