elisa試劑盒試驗原理:
試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知濃度的星空体育官网网页登陆、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nei) 進行檢測。先將生物素標記的抗體(ti) 同時溫育。洗滌後,加入親(qin) 和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然後加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chan) 生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guan) 係。
elisa試劑盒組成結構:
1、 血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nei) 毒素的試管。收集血液後,1000×g離心10分鍾將血紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用於(yu) 檢測。1000×g離心30分鍾去除顆粒。
3、 細胞上清液:1000×g離心10分鍾去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鍾,取上清液。
5、 保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反複冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍並確保樣品均勻地充分解凍。
elisa試劑盒試劑盒成分:
1 預包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親(qin) 合純化 96T
2 酶標記抗體(ti) : (30倍濃縮)HRP標記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親(qin) 合純化 0.4mL x 1
3 星空体育官网网页登陆: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2
4 EIA緩衝(chong) 液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5 標記抗體(ti) 稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6 顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7 終止液: 1N硫酸 12mL x 1
8 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供) 酶標儀(yi) (450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標紙(log/log) 吸水紙 試管(用於(yu) 星空体育官网网页登陆稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用於(yu) 洗板) 一次性試劑管(用於(yu) 濃縮酶標記抗體(ti) 和顯色劑)
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