實驗方法——抗體(ti) 檢測常用的幾種方法

一、直接法

將抗原直接固定在固相載體(ti) 上，參加酶符號的一級抗體(ti) ，即可測定抗原總量，此一級抗體(ti) 的特異性非常重要。

1. 優(you) 勢：操作手續簡略，因無須運用二抗可防止交互反響。

2. 缺陷：實驗中的一抗都得用酶符號，但不是每種抗體(ti) 都適合做符號，費用相對進步。

二、間接法

此測定辦法與(yu) 直接法相似，不一樣在於(yu) 一級抗體(ti) 沒有酶符號，改用酶符號的二級抗體(ti) 去辨識一級抗體(ti) 來測定抗原量。

1. 優(you) 勢：二抗能夠加強信號，並且有多種挑選能做不一樣的測定剖析。不加酶符號的一級抗體(ti) 則能保存它多的免疫反響性。

2. 缺陷：交互反響發作的機率較高。

三、雙抗體(ti) 夾心法

被檢測的抗原包被在兩(liang) 個(ge) 抗體(ti) 之間，其間一個(ge) 抗體(ti) 將抗原固定於(yu) 固相載體(ti) 上，即捕捉抗體(ti) 。另一個(ge) 則是檢測抗體(ti) ，此抗體(ti) 可用酶符號後直接測定抗原的量;或不符號，再透過酶符的二級抗體(ti) 來測定抗原的量。這兩(liang) 種抗體(ti) 有必要當心選擇，才可防止交互反響或競爭(zheng) 一樣的抗原部位。

1. 優(you) 勢：高活絡、高專(zhuan) 一性，抗原無須事前純化。

2. 缺陷：抗原必定得具有兩(liang) 個(ge) 以上的抗體(ti) 部位。

四、根據細胞法(xin ELISA技術) 是一種新的定性蛋白檢測技術，將細胞直接在微孔板裏培育，待檢測時，不需抽提蛋白和裂解細胞，便可直接丈量微孔板裏蛋白經影響或抑製作用後的改變。

1. 優(you) 勢：無需裂解細胞，所以方針蛋白丟(diu) 失zui少，可測定完好細胞、黏附細胞、還有非粘附細胞。

2. 缺陷：不能測定抗原量。

五、競爭(zheng) 法

樣本裏的抗原(自在抗原)和純化並固定在固相載體(ti) 上的抗原(固定抗原)一同競爭(zheng) 一樣的抗體(ti) ，當樣品裏的自在抗原越多，就能夠越多的抗體(ti) ，而固定抗原就隻能到較少的抗體(ti) ，反之亦然。經清潔過程，洗去自在抗原和抗體(ti) 的複合物，隻留下固定抗原和抗體(ti) 的複合物，拿來與(yu) 隻要固定抗原的對照組成果相比擬，依據呈色區別就可計算出樣品裏的抗原含量。

1. 優(you) 勢：可適用比擬不純的樣本，並且數據再現性很高。

2. 缺陷：全體(ti) 的敏感性和專(zhuan) 一性都較差。