胎牛血清在科研市場上應用廣泛相信大家都知道。但對於(yu) 胎牛血清的使用及保存,並不是所有人都那麽(me) 清楚,景源實驗就以胎牛血清的儲(chu) 存、常見問題及處理方法進行分析:
一、如何儲(chu) 存和解凍血清才不會(hui) 使產(chan) 品質量受損?
未拆封的血清,一般情況下應存放於(yu) -10℃至-20℃,在產(chan) 品規定的效期內(nei) 均可使用,若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內(nei) ,再放回冷凍。將血清從(cong) 冷凍冰箱取出後,先置於(yu) 2~8℃冰箱使之融解,然後在室溫下使之全融,或通過水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是,融解過程中必須規則地搖晃均勻。溶解後建議盡快使用,若長時間儲(chu) 存在2-8℃,血清中的各種(脂)蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能因凝集而形成沉澱或可見的混濁。
二、血清中絮狀沉澱,它們(men) 是什麽(me) ,怎麽(me) 處理?
1.將冷凍保存的血清取出後,置4℃冰箱靜止過夜;
2.待血清融化後,上下顛倒,輕輕混勻,繼續4℃2-3小時;
3.輕輕吸取上層血清,分裝,餘(yu) 底下50ml左右;
4.低速離心5分鍾,去掉沉澱。
三、若解凍後發現有絮狀沉澱物出現,該怎麽(me) 處理?
胎牛血清中沉澱物的出現有許多種原因,但普遍的原因是由於(yu) 胎牛血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在胎牛血清解凍後,也會(hui) 存在於(yu) 胎牛血清中,亦是造成沉澱物的主要原因之一。但這些絮狀沉澱物,並不影響胎牛血清本身的質量。若欲去除這些絮狀沉澱物,可以將胎牛血清分裝至無菌離心管內(nei) ,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yang) 基內(nei) 一起過濾。我們(men) 不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉澱物,因為(wei) 它可能會(hui) 阻塞您的過濾膜。
解凍胎牛血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若胎牛血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產(chan) 生沉澱物。解凍胎牛血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉澱的發生。請勿將胎牛血清置於(yu) 37℃太久。若在37℃放置太久,胎牛血清會(hui) 變得混濁,同時胎牛血清中許多較不穩定的成分也會(hui) 因此受到損害,而影響胎牛血清的質量。胎牛血清的熱滅活非常容易造成沉澱物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做胎牛血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鍾的原則,並且隨時搖晃均勻。
四、如何避免血清中產(chan) 生沉澱?
1.解凍時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一;
2.分裝凍存時,須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡);
3.切勿由-20℃直接至37℃水浴鍋解凍,較大的溫差,易造成蛋白質凝結而發生沉澱;
4.切勿將血清置於(yu) 37℃過長時間,否則可能使之渾濁,其中一些不穩定的組分也會(hui) 因此受到影響,最終降低血清的品質;
5.血清的熱滅活非常容易造成沉澱物的增多,若非必要,可以無須做此步驟;
6.若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鍾的原則,並且保持搖晃均勻。溫度過高、時間過久或搖晃不均勻,都會(hui) 造成沉澱物的增多。
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