實驗室細胞培養(yang) 中常見的生物汙染包括細菌汙染、黴菌汙染、支原體(ti) 汙染、黑點汙染、真菌汙染和原生動物汙染。
1、細菌汙染
細菌在普通倒置顯微鏡下呈黑色和細砂狀。根據感染菌的種類不同,可能會(hui) 呈現不同的形狀,培養(yang) 液一般會(hui) 變得渾濁、黃色,對細胞生長有明顯影響。
2、黴菌汙染
正常情況下,培養(yang) 基在 37℃ 培養(yang) 箱中培養(yang) 兩(liang) 三天,在倒置顯微鏡下仍保持透明,無雜質。一旦出現絮狀雜質,顯微鏡下可見絲(si) 狀和團塊狀漂浮物,菌絲(si) 明顯。此時,雖然細胞仍在生長,但它們(men) 的生命狀態會(hui) 在長時間後逐漸惡化。
3、支原體(ti) 汙染
支原體(ti) 是隱蔽的汙染物,不能通過過濾去除。顯微鏡下沒有任何可見的支原體(ti) 汙染跡象,比如細胞病變和濁度或 pH 值變化(即使在嚴(yan) 重汙染的培養(yang) 基中),這樣就會(hui) 導致我們(men) 產(chan) 生錯誤的安全感。而在牛血清中,支原體(ti) 是最常見的微生物之一。
4、黑點汙染
黑色的遊動點能穿透濾膜並在空氣中擴散。它們(men) 在低倍鏡下顯示為(wei) 黑色圓點,在高倍鏡下顯示為(wei) 可移動的黑色斑點。培養(yang) 液也不渾濁,一般影響較小,因此細胞仍可使用。通常,黑點汙染後,細胞生長良好,運動物體(ti) 無明顯增加,培養(yang) 基的顏色和透明度無明顯變化。在同一批血清培養(yang) 的細胞中也可以發現類似的現象。
5、真菌汙染
真菌汙染後,培養(yang) 基一般清澈,保持原色。細絲(si) 可以在顯微鏡下觀察到。最初,一些真菌類似於(yu) 死細胞碎片,但其中許多清晰可見,看起來像珊瑚,比較容易區分。此外,它們(men) 會(hui) 慢慢長出細細的黑色細絲(si) ,因為(wei) 它們(men) 生長得比較慢,不像細菌那樣容易被發現,一旦發現培養(yang) 基被汙染,它們(men) 將很難存活。
6、原生動物汙染
原生動物汙染後,細胞培養(yang) 基變得輕微渾濁。在顯微鏡下,大量的小點來回移動。雖然此時細胞仍能生長,但繁殖速度減慢,細胞生長狀態不好,邊緣不清,變得不透明。原生動物與(yu) 細胞形成共生關(guan) 係。同時,原生動物與(yu) 細胞競爭(zheng) 營養(yang) 。這種共生現象非常普遍,但以細胞為(wei) 主,因為(wei) 原生動物的數量相對較少,因而對細胞的正常生長沒有影響,隻有當它們(men) 達到一定數量時,才最終爆發成為(wei) 惡性循環。
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