材料說明
在1mmol/L三(羥甲基)氨基甲烷緩衝(chong) 液中含有基因組λDNA(TRIS)和0.01mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA)在pH 8.0下。每個(ge) 小瓶包含約1.1mL溶液。對ERM-AD442k的純度進行了研究結論是ERM-AD442k含有可忽略不計的大腸杆菌DNA。DNA質量濃度通過紫外分光光度法根據方程a計算,使用μL的變性DNA。通過dPCR的DNA拷貝數濃度使用方程式b。
用於(yu) 認證的分析方法
數字聚合酶鏈式反應測定DNA拷貝數濃度下一代測序(即羅氏公司的Illumina和GS Junior),以確定λDNA,用於(yu) 識別和量化雜質定量PCR以量化雜質紫外分光光度法測定DNA質量濃度
安全信息
適用通常的實驗室安全預防措施。使用說明和預期用途
使用說明
需要小心地重複倒置或混合以確保λDNA的均勻溶液。解凍將小瓶在4°C下放置過夜。將小瓶及其內(nei) 含物加熱至室溫然後將小瓶中的內(nei) 容物溫和地均勻化10分鍾。這種均勻化這個(ge) 過程需要再次重複。我們(men) 建議避免“侵入性"攪拌,以消除汙染也不建議向上/向下移液以避免DNA剪切力。是的建議ERM-AD442k的凍融次數不要超過5次,以保持DNA的一致性質量濃度。因此,強烈建議在第一次解凍後均質。小瓶應在層流下打開和處理,以降低汙染風險。
預期用途
這種材料的主要用途是用作校準器。該材料及其認證價(jia) 值旨在用於(yu) 校準DNA定量方法,如Quant iTTM PicoGreen®dsDNA檢測試劑盒(Life Technologies)或DNAQF定量試劑盒(Sigma-Aldrich),質量控製和評估方法性能,即檢查分析結果或校準的準確性,因為(wei) 該λDNA校準器用途廣泛,用途廣泛。作為(wei) 任何參考材料,它也可用於(yu) 建立控製圖表或用於(yu) 驗證研究。與(yu) 認證值相比,材料的指示值為(wei) 不確定性被認為(wei) 太大而無法進行認證,因此可靠性低於(yu) 認證價(jia) 值。DNA定量方法。用作校準品建議使用這種材料作為(wei) 校準器。應考慮認證值的不確定性在估計測量不確定度時考慮。
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